蛋白发酵大规模制备

德泰生物拥有成熟的蛋白表达系统和先进的蛋白表达技术。大量的蛋白是科研的前提条件，但蛋白大规模制备目前仍存在一定困难。我们提供的重组蛋白大规模制备服务包括：蛋白发酵，高密度发酵技术和工艺流程优化。德泰拥有多种类型发酵罐、生物反应器及蛋白纯化系统，可提供毫克至克级的重组蛋白。客户可根据自己的需要选择合适的表达系统和发酵方案。

服务内容

发酵服务流程

• 基因优化：基因序列是决定蛋白表达成败的关键因素，德泰自主开发的MaxCodon™生物信息学软件基因优化项包括：mRNA结构、稀有密码子、核糖体结合位点等。
• 表达条件优化：蛋白表达条件优化，包括温度、诱导物、OD等对蛋白表达量的影响因素优化，已获得后续发酵时更高的细胞培养密度和蛋白表达量。
• 发酵大规模制备：分为普通蛋白发酵和高密度发酵，包括蛋白发酵过程优化，温度、pH、溶氧、补料方式等方面。补料分批策略是高密度发酵实现高收益的最有效方法（见下文高密度发酵技术策略）。
• 蛋白纯化：在获得大量的蛋白表达菌泥，我们可以提供相应的蛋白纯化服务（可选），多种蛋白纯化方法选择，最终交付客户所需纯度的蛋白。

技术对比：

高密度发酵技术策略

补料分批策略是蛋白高密度发酵实现高收益重组蛋白的有效手段。通过调节培养条件，包括温度和酸碱值、培养物及底物的进料速率，能够最大限度地提高细胞质量和生产率。                

补料分批策略：

• 无反馈控制

定量补料—恒定的速率分批补料，结果是，有效的增长速率降低；

循序补料—循序渐进、逐步的进行补料，结果是进行一定的营养补偿，缓解因物质消耗而下降的生产速率；

指数流加补料—补料的方式采用指数的速度进行，从而实现恒定的比生长速率；

• 间接反馈控制

溶氧—随着底物的消耗，溶氧量增加进行补料，增加氧气；

pH—随着反应的进行，底物被消耗，代谢物积累，pH增加，可进行补料；

二氧化碳释放率（CEO）—蛋白发酵实验中维持特定生长速率的最常用方法。通过质谱仪检测，碳源的利用率和二氧化碳的消耗率大致成正比；

细胞培养浓度—通过激光浊度计测得细胞浓度，补料的速度由细胞培养浓度决定。

• 直接反馈控制

控制底物浓度—补料由发酵过程中碳源的浓度决定。（例如在发酵罐有实时的葡萄糖分析仪监测）

大肠杆菌菌株高密度发酵研究，通过在600nm处测得细胞的OD值