可溶性原核蛋白表达

德泰生物的原核蛋白表达服务采用大肠杆菌表达系统进行重组蛋白生产，客户只需提供目标蛋白对应的基因或蛋白序列，同时提供相关要求即可。我们会按照合同约定的表达量、纯度进行交付。
德泰自主研发的MaxCodon™密码子优化软件可有效提高目标蛋白的表达水平。对于优化表达的重组蛋白，我们首选上清纯化，若蛋白表达为包涵体，我们采用多种复性方法，使复性后的蛋白更具天然活性。

服务优势

实验流程

可选服务：我们还提供无标签蛋白表达纯化服务（Tag-Free），大规模重组蛋白制备服务，以及内毒素检测与去除服务。

案列介绍

本实验对MaxCodon™密码子优化前后的基因表达情况进行对比。

Lane 1~4：基因未优化蛋白样品
Lane 5~8：MaxCodon™密码子优化后的样品，
杂带明显减少，表达水平明显提高。

技术支持

德泰生物致力于蛋白研究十余载，每年成功向客户交付几千多组蛋白。我们的蛋白专家会查阅大量文献以了解客户蛋白的特性，确保目标蛋白可表达，可纯化，并保证稳定可溶。德泰凭借自主研发的多项技术平台，可以解决大肠杆菌外源基因表达量低和包涵体难复性难纯化多类问题，有效支撑了我公司在蛋白表达纯化技术服务上的竞争优势。
密码子优化技术：德泰开发的MaxCodon™生物信息学软件包含稀有密码子、密码子偏好性，特定功能的Motif，mRNA二级结构，载体酶切位点上下游等多方面因素的分析。
蛋白复性技术：根据包涵体蛋白质的特定结构与理化特性，筛选多种温和变复性条件，使复性后的蛋白更具天然活性。
蛋白纯化技术：德泰拥有先进的AKTA纯化系统和全套预装的离子柱、分子筛、疏水柱和亲和柱，可以纯化各类标签重组蛋白及无标签重组蛋白，可确保交付的蛋白达到>90%纯度。

FAQs

1. 我尝试过蛋白表达实验，但未成功，为什么？

蛋白不表达的原因有很多（详细分析与解决方案见原核不表达解析），一般会考虑以下几个方面的因素：

• 目的基因不适合在大肠杆菌中表达，包括密码子，mRNA结构，跨膜区等；
• 表达条件优化不够，如温度，分子伴侣，载体宿主菌的配套等；
• 原核过表达时易形成包涵体，采用温和复性条件可以提高蛋白活性。

德泰有多套成熟的解决方案，可以解决上述问题，欢迎咨询。

2. 交付的内容有哪些？交付的报告有哪些？

项目成功后，德泰会按照合同进行交付，最终交付3~5mg（纯度>90%，提供Tris/PBS保存或冻干服务）、100ul目标质粒甘油菌，100ul空载体甘油菌、蛋白质检报告（包含蛋白浓度、纯度、QA报告）以及相关实验项目报告。

3. 客户需要提供什么信息？

客户至少提供目标蛋白的基因或蛋白序列，以及对目标蛋白的要求。如果您曾经自己主导过实验，最好能够将实际情况提供给我们，这样可以为您赢得宝贵时间。