T细胞衔接器（TCE）作用机制与技术平台

细胞毒性T细胞是癌症患者治疗过程中效力最高的免疫细胞群。1992年，重组IL-2（一种T细胞活化细胞因子）获得批准，以及T细胞检查点抑制剂（如PD-1拮抗抗体帕博利珠单抗和纳武利尤单抗）的临床影响，获得了T细胞在癌症治疗中重要性的早期临床证据。更直接的证据来自自体肿瘤浸润T细胞（TILs）的治疗方法，该疗法与清淋治疗和IL-2相结合，在黑色素瘤和卵巢癌患者中产生了强烈的反应。当自体T细胞被改造为表达重组嵌合抗原受体（CAR）时，只要它们能够对细胞表面抗原进行主要组织相容性复合体（MHC）非依赖性识别，就可以在液体肿瘤中观察到高完全缓解率和持久反应，已有几种靶向CD3或BCMA的CAR-T疗法获得批准。尽管细胞疗法在非实体瘤中获得临床成功，但该治疗可能具有显著毒性，且在实体瘤中的活性有限。

T细胞衔接器（TCE）与作用机制

T细胞衔接器（T cell engager, TCE）是细胞因子、检查点抑制剂和T细胞疗法的替代疗法，它们通常基于抗体或抗体片段，能够将体内任何T细胞与表达选定表面标志物的细胞连接起来。TCE可以精确控制剂量和摄入时间，有助于最大限度地减少副作用，并且生产过程比细胞疗法要简单得多。靶向CD19、CD20、BCMA的TCE在复发/难治性（r/r）急性淋巴细胞白血病（ALL）、非霍奇金淋巴瘤（NHL）、多发性骨髓瘤（MM）已经观察到令人信服的完全缓解率。

TCE一个臂靶向肿瘤相关细胞表面抗原（TAA），另一个臂靶向TCR-CD3复合物中CD3ε亚基，结合癌症细胞和T细胞。这种结合促进T细胞和癌细胞之间免疫突触的形成，T细胞可以通过突触将穿孔素和颗粒酶注入到附着的癌细胞中。突触的形成引起TCR交联和T细胞活化，引发促炎细胞因子的释放，诱导T细胞增殖。从理论上讲，每种细胞毒性T细胞表型都可以通过这种方式结合并参与连续癌细胞裂解，包括CD8+T细胞，CD4+T细胞，γ/δT细胞和NKT细胞。通过识别细胞表面抗原，TCE使得T细胞的活化摆脱了MHC分子、抗原肽加工和呈递以及TCR特异性的限制。

TCE技术平台

IgG-like TCE

• Mosunetuzumab（Genentech, Inc.）

  Mosunetuzumab采用knobs-into-holes技术进行重链配对，采用体外退火技术进行重轻链配对，已被批准用于治疗R/R滤泡性淋巴瘤（FL）。

  

• Teclistamab（JNJ）

  Teclistamab是一种基于Genmab公司开发DuoBody^®平台的TCE，靶向BCMA/CD3，已上市用于治疗r/r多发性骨髓瘤（MM）。

  DuoBody^®平台利用限制性Fab臂交换技术（controlled Fab-arm exchange, cFAE），在两个IgG抗体的CH3区域分别引入K409R和F405L突变，利用哺乳动物细胞表达系统进行单独的重组表达与纯化，随后将两种抗体在定制条件下利用cFAE重新组合，即可高效组装获得具有正常IgG结构的双特异性抗体。Teclistamab抗体骨架为IgG4亚型，需要对其进行PAA突变（S228P L234A/L235A）除去IgG4的天然FAE过程和Fc的相关响应功能（ADCC，CDC）。

  

• Epcoritamab（AbbVie & Genmab）

  Epcoritamab也基于DuoBody^®平台，最近被批准用于治疗R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）。

• ERY974（Chugai）

  ERY974是一种靶向Glypican-3（GPC3）的TCE，用于治疗实体瘤，目前处于临床前开发阶段。它的构建是通过在CH3结构域引入静电转向突变来驱动重链的异源二聚化，同时利用共同轻链来避免轻链的错配（ART-Ig）。

• REGN1979（Regeneron）

  REGN1979为靶向CD20/CD3的TCE，该TCE使用共同轻链，并在重链CH3区域中引入突变，形成IgG1/IgG2/IgG4与IgG3的局部同型嵌合体，利用蛋白质A的选择性纯化获得双特异性抗体。REGN1979现正在适应症恶性淋巴瘤（B-NHL）的临床试验中。

  

这种TCE结构有望成为一种新平台。基于该平台，还有一些用于治疗实体瘤的TCE，包括REGN4018——靶向MUC16/CD3，用于治疗卵巢癌（OC）和REGN4336——靶向PSMA/CD3，用于治疗转移性去势抵抗性前列腺癌（mCRPC)，正在临床试验中。

基于抗体片段的TCE

虽然Fc-like TCE具有天然IgG的特性，有利于抗体药物的制备和PK/ADA特性，但或出于独特的医疗目的，或由于生产工艺技术或商业限制，基于抗体片段的TCE也逐渐走入视线。

基于抗体片段的TCE通常是——

• 由链接的scFvs, scFabs或sVDs等组成的简单结构
• 缺少半衰期延长（HLE）部分
• 难以生产，容易聚合/碎片
• 体积小，半衰期短

这类TCE的代表是Amgen公司基于BiTE^®平台，靶向CD19/CD3的Blinatumomab，已被批准用于治疗成人急性淋巴细胞白血病（BCP-ALL）及后续更多的适应症。

为了延长半衰期，减少给药频率，Amgen在BiTE^®上融合Fc结构域，产生了一系列HLE BiTE分子（分子量约为106 kD）。AMG757是一种靶向DLL3的HLE BiTEs，目前正在研究用于复发性小细胞肺癌（SCLC）治疗。

以类似的方式，MacroGenics开创了DART平台并以此平台设计了治疗性分子，这些分子将两个独立的fab以异源二聚体结构结合在一起，可根据半衰期长短进行调整，具有或不具有Fc结构域。MGD024是一种用于治疗r/r CD123(+)血液系统恶性肿瘤患者的靶向CD123/CD3的Dart TCE，目前已进入临床研究。

Harpoon公司开发了针对实体瘤和血液系统恶性肿瘤T细胞激活性多功能抗体，抗体基于其创建的TriTAC、ProTriTAC（前药）和TriTAC-XR三个三特异抗体平台，这些TCE平台引入了单域抗体，并通过结合白蛋白来延长半衰期。

TriTAC仅含有一条肽链，包含三个结构域，分别结合CD3，人血清白蛋白和TAA。其中结合CD3表位的抗体为单链抗体（scFv），结合人血清白蛋白和TAA的抗体为纳米抗体。
此外，Immunocore公司开发的第一种也是唯一一种被批准用于实体瘤（黏膜黑色素瘤，mUM）治疗的TCE——Tebentafusp-tebn（KIMMTRAK），由TCRm和靶向CD3的scFv组成。

其他类型的TCE

• EMB-07/EMB-06

  EMB-07是利用EpimAb的FIT-Ig平台设计的，靶向ROR1/CD3的TCE，用于实体瘤的治疗，目前正在进行临床评估。

  Appended-IgG在常规IgG上附加scFv、Fab或纳米抗体。它们的半衰期与亲代IgG相当。然而，非自然结构可能会增加聚集性、不稳定性和ADA风险。FIT-Ig平台在不引入突变或连接子（linker）的情况下产生双特异性抗体，有利于其制备和稳定性。

  EMB-06是另一种基于FIT-Ig平台的靶向BCMA的TCE，目前也在临床评估中。

• BA1202

  BA1202为Boan Biotech靶向CEA/CD3的对称三价单链抗体，其具有类似蝴蝶形的抗体结构：Fab端与CEA双价结合，而轻链C端连接的二价单链抗体与CD3单价结合（可能是由于空间构象的改变或亲和力降低），目前已进入临床试验阶段。

• Cibisatamab (RG7802)

  Cibisatamab是一种靶向CEA/CD3的TCE，通过将第二个与CEA结合的Fab区添加到对称KIH结构来实现与疾病靶点的“低亲和力（affinity）高亲合力（avidity）”结合，试图通过减少脱靶毒性来实现疗效和安全性的平衡。目前该TCE正在临床试验中。

  

• CX-904

  CX-904是由Cytomx公司为精准靶向设计的前体药物，在肿瘤微环境中通过特异性蛋白水解条件被激活，靶向EGFR/CD3，目前正在临床试验中。

• Imvotamab (IGM-2323)

  Imvotamab是靶向CD20和CD3的IgM同种型TCE。Imvotamab拥有10个CD20结合域，比IgG同种型的抗体有更高的亲合力，从而能够克服靶点减少引起的耐药，并实现比目前已批准的抗体疗法更好的疗效。该公司更多的IgM TCE药物包括IgM-2644(CD38/CD3)和IgM-2537(CD123/CD3)。

• TNB-486

  TNB-486是一种由Tenobio公司开发靶向CD19的不对称TCE。它的形式介于IgG-like TCE和基于抗体片段TCE之间。它由一半结合CD3的IgG和一半结合CD19的重链抗体（HcAb）组成，目前正针对r/r B淋巴瘤进行临床评估。

• YBODY

  与TNB-486格式相似，YZYBio公司的YBODY平台由一半与疾病靶点结合的IgG和一半与CD3结合的scFv组成。一些基于YBODY平台的TCE目前正在临床试验中，如M802（HER2/CD3）。

  

参考文献
[1]Baeuerle PA, Wesche H. T-cell-engaging antibodies for the treatment of solid tumors: challenges and opportunities. Curr Opin Oncol. 2022 Sep 1;34(5):552-558. doi: 10.1097/CCO.0000000000000869.
[2]Pillarisetti K, Powers G, Luistro L, et al.Teclistamab is an active T cell-redirecting bispecific antibody against B-cell maturation antigen for multiple myeloma. Blood Adv. 2020 Sep 22;4(18):4538-4549. doi: 10.1182/bloodadvances.2020002393.
[3]Smith, E., Olson, K., Haber, L. et al. A novel, native-format bispecific antibody triggering T-cell killing of B-cells is robustly active in mouse tumor models and cynomolgus monkeys. Sci Rep 5, 17943 (2016). https://doi.org/10.1038/srep17943.

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