亚型指的是相同的构成方式,但是空间结构不同的蛋白质结构。抗体亚型,指的是在机体内产生的“Y”构型的免疫球蛋白(Ig),基于小分子多肽结构上的差异,可以进一步的进行细分。
抗体以一个或者多个“Y”字形单体存在,每个“Y”字形单体由 4 条多肽链组成,包含两条相同的重链和两条相同的轻链。 通常,抗体的种类由重链决定。例如哺乳动物Ig的重链一共有五种,分别用希腊字母α、δ、ε、γ和 μ 来命名,相对应组成的抗体就称为 IgA、IgD、IgE、IgG 和 IgM。其中,人的γ可以进一步细分为γ1、γ2、γ3、γ4等亚类,分别对应IgG1, IgG2, IgG3和IgG4四个亚型,小鼠γ可以进一步细分为γ1、γ2a、γ2b、γ3等亚类,分别对应IgG1, IgG2a, IgG2b和 IgG3四个亚型。
哺乳动物有两种轻链:λ型和κ型。出于科研的需要,人们也会对轻链的亚型进行鉴定。
类/亚类 | 重链 | 轻链 | 分子量(kDa) | 结构 | 功能 |
IgA1 IgA2 |
α1 α2 |
λ或κ | 150-600 | 单体-四聚体 | IgA有血清型和分泌型,血清型IgA不显示重要的免疫功能,分泌型IgA存在于分泌液中,如唾液、泪液、初乳、鼻和支气管分泌液等,是机体粘膜局部抗感染免疫的主要抗体。 |
IgD | δ | λ或κ | 150 | 单体 | 功能不详; 与IgM共同存在于B细胞发育的各个阶段;大部分与B细胞结合。 |
IgE | ε | λ或κ | 190 | 单体 | 结合变应原引发巨细胞释放组胺,可以对抗寄生虫感染。 |
IgG1 IgG2 IgG3 IgG4 |
γ1 γ2 γ3 γ4 |
λ或κ | 150 | 单体 | 血清中最主要的免疫球蛋白。在免疫反应中最主要的抵御病原的侵袭的抗体为IgG; 可通过胎盘。 |
IgM | μ | λ或κ | 900 | 五聚体 | 最早产生的反应性抗体,在B细胞表面表达,分泌型有很高的亲和力。在B细胞介导的免疫反应早期,产生足够的IgG之前发挥消除病原菌的作用。 |
表1:不同亚型抗体的结构与功能
目前比较常用的方法是利用试剂盒进行抗体亚型的鉴定,按照试剂盒说明书进行操作,便可以直观的读出抗体的亚型。
常见问题 | 可能原因 | 解决方案 |
多种重链结果 | 腹水中有杂抗体 | 将腹水样本至少 1:100000稀释 |
样本中抗体浓度过高 | 再将样本 1:2-1:10 稀释 | |
杂交瘤细胞中含有多种细胞系 | 亚克隆杂交瘤细胞 | |
显色较慢或颜色较弱 | 样本中抗体浓度低 | 减少稀释倍数;延长显色时间 |
结果难以判定 | 多种重链或轻链结果 | 再将样本 1:4 或 1:8 稀释后重新检测 |
表2:常见问题与解决方案
不同亚型的抗体在结构上有所区别,其免疫源性与在体内发挥的作用存在差异,对抗体进行进一步的细分,并进行抗体亚型鉴定,对于疾病作用机理的研究、抗体药物的开发有重要意义。
抗体亚型鉴定服务:IgG1,IgG2a,IgG2b,IgG3,IgM,IgA的鉴定。
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